腺苷脱氨酶（ADA）比色法测试盒

腺苷脱氨酶（ADA）测试盒说明书

一、测定原理

腺苷脱氨酶（Adenosine deaminase，ADA）催化腺嘌呤核苷水解，产生次黄嘌呤核苷和氨，然后对产生的氨进行显色，从而可以计算血清 ADA 的活性。

腺苷脱氨酶（ADA）比色法测试盒 

二、试剂组成及配制（100 管/48 样）：

试剂一：粉剂×6 支，稀释液 5ml×6 瓶，4℃保存，临用前 2 小时每支粉剂用 1 瓶稀释液溶解。

[注]:需充分混匀*溶解，否则会影响结果。配好后4C保存48小时。

试剂二：粉剂×2 支，稀释液 100ml×2 瓶，临用时每支粉剂用 1 瓶稀释液溶解即成，4℃避光

腺苷脱氨酶（ADA）比色法测试盒 

保存。

试剂三：贮备液 2ml×2 瓶，稀释液 100ml×2 瓶。临用时每瓶贮备液用 1 瓶稀释液稀释

即成，4℃避光保存，可稳定两个月。

试剂四：1mg 氨氮/ml 标准贮备液 1ml×1 瓶，4℃保存。

25µg 氨氮/ml 标准应用液的配制：取 1mg 氨氮/ml 标准贮备液 0.25ml 用双蒸水定容至 10ml，充分混匀，现用现配。

腺苷脱氨酶（ADA）比色法测试盒 

三、操作表：

混匀，37℃水浴 30 分钟后，室温静置 10 分钟，波长 640nm，1㎝光径，双蒸水调零，测各管吸光度值。

【注】本试剂盒可测定10%组织匀紫中的ADA. 但是显色后需3500转/分钟，离心10分钟后才能进行比色

腺苷脱氨酶（ADA）比色法测试盒 

四、单位定义与计算公式：

（一）、血清中 ADA 酶活性的计算：

1、单位定义：1ml 血清在 37℃和底物作用 60 分钟产生 1µg 氨氮为一个酶活性单位。

2、计算公式：

腺苷脱氨酶（ADA）比色法测试盒 

血清中ADA   测定OD值 - 对照OD值   标准应用液浓度               活性 (U / ml ) ⁼ 标准OD值 - 空白OD值 ^´ 25m g氨氮 /ml

1. 计算举例

取某人血清按操作表进行ADA的检测，测得各管吸光度为：空白管0.08，标准管0. 070，测定管0. 173，对照管0.113 。则计算如下:

血清中ADA   测定OD值 - 对照OD值   标准应用液浓度               活性 (U / ml ) ⁼ 标准OD值 - 空白OD值 ^´ 25m g氨氮 /ml

    0.173 - 0.1131

 ⁼    0.070 - 0.008    ^{´25 =24.1} (U / ml )

（二）、组织匀浆中 ADA 酶活性的计算：

1、单位定义：每毫克组织蛋白在 37℃和底物作用 60 分钟产生 1µg 氨氮为一个酶活性单位。

2、计算公式：

        3、计算举例:

取10%鸡肝组织匀浆按操作表进行ADA的检测，测得各管吸光度为:空白管值0.008,标准管OD值0.070,测定管OD值0.237,对照管OD值0.202，测得10%鸡肝组织匀浆的蛋白含量^*为14. 14mgprot/ml.则计算如下:

五．测定意义

ADA广泛分布于各组织中，以盲肠、小肠粘膜和脾中含量高，肝中含量仅为小肠的7%~14%，肝脏中90%在细胞质中，细胞核含量低，但却是胞核中有关核酸代谢酶中含量的一个。

在肝脏疾病中，ADA 活性增高。阻塞性黄疸时此酶活性一般不升高， 而在肝实质性损伤时，此酶和ALT同时升高，故有助于鉴别。在慢性活动性肝炎和肝硬化时ALT阳性率较低，而ADA阳性率可达90%左右，增高较明显。

腺苷脱氨酶（ADA）比色法测试盒